کیت Real time onestep
کیت ریل تایم وان استپ یک سیستم پیشرفته تشخیص مولکولی است که فرآیند رونوشتبرداری معکوس و تکثیر DNA را در یک مرحله واحد ادغام میکند. از دیدگاه فنی، این ادغام از طریق طراحی هوشمندانه بافر واکنش و آنزیمهای ویژه امکانپذیر شده است. در این سیستم، از آنزیم رونوشتبردار معکوس با پایداری حرارتی بالا در کنار DNA پلیمراز مقاوم به حرارت استفاده میشود که قادرند در یک محیط واکنشی واحد فعالیت بهینه خود را حفظ نمایند.
مکانیسم مولکولی این کیت مبتنی بر انجام همزمان مراحل مختلف در یک لوله واکنش است. در مرحله اول، آنزیم رونوشتبردار معکوس در دمای ۵۰ تا ۵۵ درجه سانتیگراد، RNA هدف را به cDNA تبدیل میکند. سپس با افزایش دما به ۹۵ درجه سانتیگراد، هر دو آنزیم فعال باقی میمانند و بلافاصله فرآیند تکثیر DNA آغاز میشود. این گذار سریع بین مراحل مختلف بدون نیاز به افزودن مواد اضافی یا باز کردن درب لوله واکنش صورت میپذیرد.
طراحی پرایمرها و پروبها در این سیستم از اهمیت ویژهای برخوردار است. پرایمرهای مورد استفاده معمولاً در ناحیهای از ژن طراحی میشوند که از نظر توالی اختصاصی بوده و فاقد ساختارهای دوم پیچیده باشد. پروبهای Tagman به کار رفته در این کیت شامل یک گزارشگر فلورسنت در یک انتها و یک خاموشکننده در انتهای دیگر هستند که در حالت عادی فلورسانس آن خاموش است. هنگام تکثیر محصول، پروب تجزیه شده و فلورسانس آن آزاد میشود.
بهطور دقیقتر، زمانی که DNA پلیمراز در حین سنتز به پروب متصل میشود، فعالیت اگزونوکلئازی آن باعث جدا شدن گزارشگر از خاموشکننده شده و سیگنال فلورسنت تولید میکند. شدت این سیگنال مستقیماً با مقدار محصول تکثیر شده مرتبط است و امکان محاسبه کمی مقدار اولیه RNA هدف را فراهم میکند.
شرکت bio-rad با بهرهگیری از فناوری نانوذرات و پلیمرهای اختصاصی، موفق به توسعه فرمولاسیونی شده است که پایداری آنزیمها را در شرایط مختلف تضمین میکند. در این کیت، از مهارکنندههای RNase قوی استفاده شده که از تخریب RNA در مراحل اولیه واکنش جلوگیری میکند. همچنین حضور تثبیتکنندههای پروتئینی باعث میشود آنزیمها در برابر نوسانات دما مقاومت بالایی از خود نشان دهند.
از نظر تکنیکی، این کیت قادر به تشخیص تفاوت یک نوکلئوتیدی در توالی هدف است که آن را برای کاربردهای تشخیص جهشهای ژنی ایدهآل میسازد. طراحی سیستم چندکاناله در این کیت امکان استفاده همزمان از چهار رنگ فلورسنت مختلف را فراهم میکند که این ویژگی در پانلهای تشخیصی چندگانه کاربرد گستردهای دارد.
شرکت آزماکالا با درک اهمیت پارامترهای فنی، این کیت را با ارائه برگه مشخصات کامل فنی شامل اطلاعات مربوط به حد تشخیص، دقت، صحت و محدوده خطی در اختیار محققان قرار میدهد. پشتیبانی فنی تخصصی این شرکت شامل بهینهسازی پروتکل برای نمونههای مختلف و راهنمایی در زمینه طراحی پرایمر و پروب نیز میباشد.
تضمین کیفیت این محصول توسط آزماکالا شامل تستهای عملکردی متعدد از جمله ارزیابی کارایی واکنش، حساسیت تشخیص و اختصاصیت است. این شرکت با انجام کنترل کیفی دقیق بر هر batch وارداتی ، اطمینان حاصل میکند که محصولات ارائه شده دارای عملکرد یکنواخت و قابل اطمینان هستند.
برای پژوهشگرانی که در حوزه بیان ژن فعالیت میکنند، این کیت با ارائه دادههای کمی دقیق و تکرارپذیر، امکان مطالعه تغییرات ظریف در سطوح بیان ژن را فراهم میآورد. در حوزه تشخیصی و تحقیقاتی نیز، دقت و حساسیت بالا همراه با سرعت اجرای آزمون، این کیت را به ابزاری ارزشمند در تشخیصهای بالینی تبدیل کرده است.
شرکت آزماکالا با گردآوری تیم متخصصان زیستشناسی مولکولی، آماده ارائه خدمات فروش و مشاوره تخصصی کیت های آزمایشگاهی و ارایه تخصصی پروتکلها میباشد. این پشتیبانی جامع علمی، محققان را قادر میسازد تا حداکثر بهرهوری را از قابلیتهای پیشرفته این کیت به دست آورند.
بدون دیدگاه