محیط کشت Baird Parker Agar
محیط کشت برد پارکر آگار که به اختصار BPA نیز نامیده میشود، یکی از مهمترین و تخصصیترین محیطهای کشت انتخابی و تشخیصی در میکروبیولوژی مواد غذایی، دارویی و بالینی به شمار میرود. این محیط برای اولین بار توسط محققی به نام برد پارکر در سال ۱۹۶۲ معرفی گردید و از آن زمان تا به امروز به عنوان استاندارد طلایی جداسازی و شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس و سایر استافیلوکوکهای کواگولاز مثبت در سطح ملی و بینالمللی شناخته میشود. شرکت آزماکالا با ارائه محصولات با کیفیت از برندهای مطرح جهانی همچون Liofilchem ایتالیا، Himedia هند و Merck آلمان، نقشی کلیدی در تأمین این محیط حساس و تخصصی برای آزمایشگاههای کشور ایفا مینماید.
ماهیت علمی و تخصصی محیط کشت Baird Parker Agar در ترکیب هوشمندانه مواد مغذی، عوامل انتخابی و مواد تشخیصی نهفته است که با یکدیگر تعامل هماهنگی دارند. فرمول استاندارد این محیط شامل ترکیبات زیر است. تریپتون یا پانکراتیک دیژست کازئین به میزان ۱۰ گرم در لیتر که منبع غنی از نیتروژن، کربن، اسیدهای آمینه و پپتیدهای زنجیره بلند برای رشد میکروارگانیسمها فراهم میکند. عصاره گوشت یا HM پپتون B معادل با عصاره گوشت گاو به میزان ۵ گرم در لیتر که علاوه بر تأمین مواد مغذی، ویتامینها و مواد معدنی ضروری برای رشد باکتری را نیز تأمین مینماید. عصاره مخمر به میزان ۱ گرم در لیتر به عنوان منبعی غنی از ویتامینها به ویژه ویتامینهای گروه B عمل میکند. سدیم پیرووات به میزان ۱۰ گرم در لیتر یک ماده حیاتی و کلیدی در این محیط محسوب میشود زیرا از سلولهای آسیب دیده استافیلوکوک اورئوس محافظت کرده و به بازیابی و احیای آنها کمک شایانی میکند. مطالعات نشان دادهاند که سدیم پیرووات بدون تخریب ویژگی انتخابی محیط، رشد استافیلوکوک اورئوس را به طور قابل توجهی تحریک و تسریع مینماید. گلیسین به میزان ۱۲ گرم در لیتر یکی از عوامل مهارکننده انتخابی است که به همراه لیتیوم کلراید رشد اکثر میکروفلورهای همراه را سرکوب میکند اما در عین حال رشد استافیلوکوک اورئوس را مهار نمینماید. لیتیوم کلراید به میزان ۵ گرم در لیتر به عنوان یک مهارکننده قوی و انتخابی عمل کرده و از رشد طیف وسیعی از باکتریهای مزاحم جلوگیری میکند. پتاسیم تلوریت ماده تشخیصی بسیار مهمی است که در نهایت با غلظت معین به محیط اضافه میشود. این ترکیب سمی توسط استافیلوکوکهای کواگولاز مثبت به تلوریوم احیا میشود که نتیجه آن تشکیل کلنیهای سیاه و براق با ظاهری فلزی و مشخص است. سولفامتازین در فرمولاسیونهای خاص با غلظت ۵۰ میلیگرم در لیتر به محیط اضافه میشود تا در مواردی که نمونهها مشکوک به حضور باکتری پروتئوس هستند، از رشد و مهاجرت این باکتری مزاحم بر روی سطح آگار جلوگیری به عمل آید. ایمولسیون زرده تخممرغ که پس از استریلیزاسیون پایه آگار و پیش از ریختن در پلیتها به محیط اضافه میشود، نقش کلیدی در واکنش تشخیصی دارد. این ماده مغذی باعث کدر و زرد رنگ شدن محیط میشود. آگار به میزان ۱۷ تا ۲۰ گرم در لیتر به عنوان عامل جامدکننده عمل میکند و بستر مناسب برای رشد کلنیها را فراهم میآورد. تمام این ترکیبات به گونهای با یکدیگر تنظیم شدهاند که pH نهایی محیط در دمای ۲۵ درجه سانتیگراد در محدوده ۶.۸ تا ۷.۲ قرار گیرد که شرایط فیزیولوژیک مطلوبی را برای رشد استافیلوکوک اورئوس فراهم میآورد.
اصل عملکرد این محیط مبتنی بر دو ویژگی اساسی انتخابگری و تشخیصگری است. در بعد انتخابگری، ترکیب گلیسین و لیتیوم کلراید به همراه غلظت سمی پتاسیم تلوریت به گونهای ماهرانه متوازن شدهاند که رشد اکثر باکتریهای موجود در مواد غذایی، آب، محیط و سایر نمونهها را بدون ایجاد بازدارندگی بر روی استافیلوکوکوس اورئوس مهار میکنند. در بعد تشخیصگری، دو واکنش اصلی قابلیت شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس را فراهم میآورند. واکنش نخست کاهش پتاسیم تلوریت است. استافیلوکوکوس اورئوس و سایر استافیلوکوکهای کواگولاز مثبت دارای آنزیمهای خاصی هستند که تلوریت را به تلوریوم فلزی احیا میکنند. این فرآیند باعث میشود کلنیهای باکتری به رنگ سیاه یا خاکستری تیره با ظاهری براق و شیشهای درآیند. واکنش دوم تخریب زرده تخممرغ است. استافیلوکوکوس اورئوس با ترشح آنزیم لسیتیناز قادر به تجزیه لسیتین موجود در زرده تخممرغ است که نتیجه آن تشکیل یک هاله شفاف و روشن در اطراف کلنیهای باکتری است. با ادامه انکوباسیون، هاله شفاف به تدریج به یک هاله کدر و مات تبدیل میشود که این پدیده ناشی از فعالیت لیپازی باکتری است.
مشاهدات تجربی نشان میدهد که کلنیهای تیپیک استافیلوکوکوس اورئوس روی این محیط پس از ۲۴ تا ۴۸ ساعت انکوباسیون در دمای ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتیگراد به صورت کلنیهای سیاه یا خاکستری تیره، براق، محدب، با قطر تقریبی یک تا یک و نیم میلیمتر و با حاشیهای سفید و باریک ظاهر میشوند که احاطه شده توسط یک هاله شفاف و روشن هستند. برخی از سویهها ممکن است تنها کلنی سیاه و بدون هاله شفاف یا بالعکس هاله شفاف و بدون رنگدانه سیاه تولید کنند که در چنین مواردی انجام تست کواگولاز برای تأیید نهایی ضروری است. باکتری استافیلوکوک ساپروفیتیکوس نیز ممکن است پدیده هاله شفاف را نشان دهد اما زمان ظهور هاله در این باکتری طولانیتر است و تفاوت در زمان انکوباسیون، پرسنل مجرب را قادر به تمایز میان این دو باکتری میسازد.
اهمیت و کاربرد محیط Baird Parker Agar فراتر از یک محیط کشت ساده بوده و این محیط در حال حاضر به عنوان مرجع رسمی در استانداردهای معتبر بینالمللی متعددی از جمله ISO 6888-1، FDA-BAM، APHA، EN ISO 6888-1:2021 و همچنین فارماکوپه اروپا و فارماکوپه بریتانیا معرفی شده است. اصلیترین حوزه کاربرد این محیط در صنایع غذایی است زیرا استافیلوکوکوس اورئوس یکی از شایعترین عوامل مسمومیت غذایی در سراسر جهان محسوب میشود و تولید انتروتوکسین مقاوم به حرارت در مواد غذایی، خطر جدی برای سلامت مصرفکنندگان ایجاد میکند. این محیط قادر است با حساسیت و ویژگی بالا، حتی مقادیر بسیار اندک این باکتری را در انواع ماتریکسهای غذایی از جمله لبنیات، گوشت و فرآوردههای گوشتی، کنسروها، مواد غذایی آماده مصرف، شیر خشک نوزادان و سایر محصولات لبنی شناسایی و شمارش نماید. در صنایع دارویی و آرایشی بهداشتی نیز این محیط برای انجام آزمونهای حد میکروبی و کنترل کیفیت محصولات نهایی به کار میرود زیرا وجود استافیلوکوکوس اورئوس در محصولات دارویی به ویژه محصولات چشمی، تزریقی و موضعی میتواند عواقب خطرناکی برای بیماران به همراه داشته باشد. همچنین در آزمایشهای کنترل محیط و پرسنل بیمارستانها و صنایع دارویی، از این محیط برای پایش آلودگی به استافیلوکوکوس اورئوس استفاده میشود که این امر نقش مهمی در پیشگیری از عفونتهای بیمارستانی ایفا میکند. در صنایع دامپزشکی و خوراک دام نیز این محیط برای بررسی آلودگی خوراک و مواد اولیه دامی کاربرد دارد.
شرکت آزماکالا به عنوان یکی از تأمینکنندگان معتبر و تخصصی محصولات میکروبیولوژی در ایران، محیط کشت Baird Parker Agar را در سه برند مطرح و معتبر جهانی ارائه میدهد. برند Liofilchem ایتالیا با سابقه طولانی در تولید محیطهای کشت با کیفیت و محصولات میکروبیولوژی، محصولات خود را منطبق با استانداردهای ISO 6888-1، FDA-BAM و APHA عرضه میکند. این برند فرمولاسیونهای خاصی از Baird Parker Agar را نیز ارائه میدهد که حاوی مواد خنثیکننده باقیمانده مواد ضدعفونیکننده است و برای نمونهبرداریهای محیطی و بهداشت پرسنل بسیار مناسب میباشد. برند Himedia هند به عنوان یکی از بزرگترین تولیدکنندگان محیطهای کشت و مواد میکروبیولوژی در جهان، محصولات خود را تحت گواهینامههای معتبر بینالمللی از جمله ISO 9001، ISO 13485، FDA و WHO-GMP تولید میکند. محیط Baird Parker Agar این شرکت به عنوان بهترین گزینه برای جداسازی انتخابی و افتراق مناسب سویههای کواگولاز مثبت استافیلوکوک در مواد غذایی و سایر مواد شناخته شده است و توسط سازمان AOAC International نیز به تصویب رسیده است. برند Merck آلمان به عنوان یکی از معتبرترین و شناختهشدهترین برندهای جهانی در حوزه مواد شیمیایی و میکروبیولوژی، محصول Baird Parker Agar خود را با نام تجاری GranuCult و NutriSelect در دو نوع گرانوله و پودری با کیفیتهای مختلف کنترل کیفی از Basic تا Prime عرضه میکند که نیازهای متنوع آزمایشگاههای پیشرفته و حساس را پوشش میدهد. این محصولات Merck دارای تأییدیههای کامل از استانداردهای ISO 6888، FDA-BAM و APHA هستند. شرکت آزماکالا با بهرهمندی از زنجیره تأمین مطمئن و توزیع گسترده، بستهبندیهای متنوعی از جمله بستههای ۱۰۰، ۵۰۰ گرمی و همچنین پلیتهای آماده مصرف از این سه برند معتبر را به آزمایشگاههای مواد غذایی، دارویی، آرایشی بهداشتی، بالینی و تحقیقاتی سراسر کشور ارائه میدهد تا محققان و متخصصان با اطمینان و آسودگی خاطر از کیفیت و دقت نتایج، به انجام دقیق آزمونهای میکروبیولوژی خود بپردازند.
بدون دیدگاه