محیط کشت PE-2

محیط کشت تخصصی PE-2

محیط کشت تخصصی PE-2 یک محیط کشت غنی و انتخابی است که برای اهداف بسیار مشخص در حوزه میکروبیولوژی مواد غذایی طراحی و فرموله شده است. این محیط کشت که تحت عنوان براث PE-2 نیز شناخته می‌شود، برای اولین بار توسط دانشمندانی به نام‌های فولیناتزو و تروی در سال ۱۹۵۴ معرفی گردید و اندکی پس از آن، توسط انجمن بهداشت عمومی آمریکا یا به اختصار APHA به عنوان یک استاندارد طلایی برای کاربردهای خاص مورد تایید و توصیه قرار گرفت. ماهیت اصلی این محیط کشت، شناسایی و شمارش میکروارگانیسم‌های مزوفیل بی‌هوازی اسپورزا یا همان هاگ‌ساز است که عمدتاً به جنس کلستریدیوم تعلق دارند. اهمیت این میکروب‌ها در صنایع غذایی به قدری زیاد است که وجود حتی تعداد کمی از آن‌ها می‌تواند منجر به فساد گسترده محصولات تجاری و بسته‌بندی شده و خسارات مالی سنگینی را به همراه داشته باشد. کلستریدیوم‌ها به دلیل توانایی ذاتی خود در تشکیل اسپور یا هاگ، از مقاومت حرارتی بسیار بالایی برخوردار بوده و می‌توانند فرآیندهای حرارتی معمول در صنایع غذایی مانند پاستوریزاسیون را تحمل کنند و در شرایط بی‌هوازی ایجاد شده در بسته‌بندی‌های خلاء یا کنسروها، شروع به رشد و تکثیر نمایند.

فرمولاسیون شیمیایی محیط PE-2 به گونه‌ای طراحی شده است که تمامی نیازهای تغذیه‌ای این دسته از باکتری‌های سخت‌پسند را فراهم نماید. در یک لیتر آب مقطر یا دیونیزه شده، به طور استاندارد بیست گرم پپتون حل می‌گردد که منبع اصلی تأمین ازت، اسیدهای آمینه و پپتیدهای کوتاه زنجیره برای ساخت پروتئین میکروبی است. همچنین سه گرم عصاره مخمر نیز به ترکیب افزوده می‌شود که این ماده به عنوان یک منبع غنی از ویتامین‌های گروه B و سایر فاکتورهای رشد ضروری برای متابولیسم میکروب‌ها عمل می‌کند. نکته بسیار کلیدی و متمایز کننده این محیط کشت، حضور نادر نوع خاصی از نخود فرنگی بکر یا حقیقی موسوم به نخود فرنگی آلاسکا (Alaska Seed Peas) در ترکیب آن است. این ماده خام که فرآیند حرارتی بر روی آن انجام نمی‌شود، به عنوان یک عامل حیاتی برای ایجاد شرایط بی‌هوازی در محیط عمل می‌کند؛ چرا که دانه‌های نخود در طی فرآیند استریلیزاسیون و انکوباسیون، اکسیژن محلول در محیط را مصرف کرده و یک لایه احیاشده مناسب برای رشد باکتری‌های بی‌هوازی اجباری ایجاد می‌کنند. علاوه بر این، مقدار چهل میلی‌گرم برم کرزول بنفش یا برموکرزول پورپل به عنوان یک نشانگر یا اندیکاتور pH به محیط اضافه می‌شود. این ماده رنگی در pH خنثی اولیه که در حدود ۶.۹ تا ۷.۱ است به رنگ بنفش مایل به ارغوانی در می‌آید و در صورت تولید اسید توسط باکتری‌های تخمیرکننده، رنگ آن به زرد تغییر پیدا می‌کند و بدین ترتیب یک سیستم هشدار بصری برای تشخیص فعالیت متابولیکی میکروارگانیسم‌ها فراهم می‌آورد. ترکیب نهایی این مواد در یک لیتر آب مقطر، وزنی معادل ۲۳.۰۴ گرم پودر خشک را تشکیل می‌دهد و در نهایت pH نهایی محیط در دمای ۲۵ درجه سانتی‌گراد در محدوده ۶.۸ تا ۷.۰ تنظیم و تثبیت می‌شود.

اهمیت کاربردی محیط PE-2 را نمی‌توان در یک یا دو جمله خلاصه کرد بلکه این محیط در خط مقدم مبارزه با فساد مواد غذایی و تضمین سلامت محصولات کارخانه‌ای ایستاده است. بزرگترین و مهمترین حوزه کاربرد این محیط کشت، صنایع فرآوری مواد غذایی و به ویژه خطوط تولید مواد غذایی کم اسید نظیر سبزیجات و صیفی‌جات خشک شده، ادویه‌جات، انواع کنسروهای گوشتی و گیاهی و همچنین فرآورده‌های گوشتی عمل‌آوری شده نظیر سوسیس و کالباس است که در بسته‌بندی‌های بدون هوا یا اتمسفر اصلاح شده نگهداری می‌شوند. این محیط امکان تشخیص و شمارش دقیق کلستریدیوم بوتولینوم را فراهم می‌کند که سمی کشنده و نوروتوکسین مهلکی تولید می‌کند و همچنین کلستریدیوم اسپوروژنز که یکی از عوامل اصلی فساد پروتئولیتیک در مواد غذایی پروتئینی و ترموآناروباکتریوم ترموساکارولیتیکوم که به عنوان عامل ایجاد فساد تخت یا Flat Sour در کنسروهای قوطی‌ای شناخته می‌شود، را نیز شامل می‌گردد. آزمایش بر روی نمونه‌های صنعتی شامل استفاده از آرد، نشاسته، قند حرارت دیده و همچنین نمونه‌های ادویه و سبزیجات خشک است؛ بدین صورت که نمونه مورد نظر به نسبت معینی با محیط تازه استریل شده مخلوط می‌شود و سپس در دمای ۳۰ تا ۳۵ درجه سانتی‌گراد که دمای ایده‌ال برای رشد میکروب‌های مزوفیل است، به مدت ۷۲ ساعت تا ۷ روز گرمخانه‌گذاری می‌گردد. از دیگر تکنیک‌های بسیار رایج در این حوزه، استفاده از روش MPN یا محتمل‌ترین تعداد سلول زنده است که در آن رقت‌های سریالی از نمونه در لوله‌های حاوی این محیط کشت تلقیح شده و با مشاهده رشد و تولید اسید و گاز، غلظت جمعیت میکروبی در نمونه اولیه تعیین می‌گردد. همچنین مطالعات علمی نشان داده است که ارقام مختلف نخود فرنگی بر کارایی این محیط تأثیر می‌گذارند و در حالی که ارقامی نظیر آلاسکا، کلمبیان و یلو عملکرد مطلوبی دارند، برخی واریته‌های خاص ممکن است نتایج مثبت کاذب ایجاد کنند که این موضوع لزوم استانداردسازی دقیق مواد اولیه را یادآور می‌شود. یک نسخه پیشرفته‌تر و گیاهی از این محیط تحت عنوان PE-2 HiVeg نیز توسط برخی تولیدکنندگان عرضه شده است که در آن پپتون حیوانی با پپتون‌های تعریف شده و استاندارد گیاهی جایگزین می‌گردد تا ریسک انتقال عوامل بیماری‌زایی نظیر جنون گاوی را به طور کامل حذف نماید.

شرکت معتبر علمی آزماکالا به عنوان یک مرجع تخصصی و قدیمی با بیش از دو دهه تجربه موفق در عرصه واردات و توزیع تجهیزات پیشرفته آزمایشگاهی و مواد شیمیایی با گریدهای صنعتی و تحقیقاتی، با بهره‌مندی از دانش فنی و همکاری مستقیم با برترین برندهای بین‌المللی و دارا بودن تیمی از کارشناسان مجرب، محیط کشت فوق تخصصی PE-2 را از تولیدکننده های بزرگ و صاحب نام جهانی همچون Merck ,Himedia,Liofilchem,Sigma برای محققان، صنایع غذایی، مراکز کنترل کیفیت و آزمایشگاه‌های تشخیص طبی کشور فراهم می‌سازد.