نقد و بررسی کیت مستر میکس PCR-شرکتABI
کیت مستر میکس PCR
مواد مورد نیاز برای انجام واکنش PCR شامل آنزیم Taq پلیمراز، بافر مخصوص آنزیم ، MgCl2، پرایمر های اختصاصی طراحی شده از قطعه مورد نظر، DNA الگو و نوکلئوتید ها (dNTPs) هستند.
کیت مستر میکس PCR
PCR یا واکنش زنجیره ای پلی مراز (Polymerase chain reaction) تکنیکی ست برای ساخت تعداد زیادی کپی از ناحیه ای خاص از DNA به صورت in vitro (درون لوله آزمایش و نه درون بدن موجود زنده). این تکنیک دارای کاربرد های فراوان تحقیقاتی و آزمایشگاهی ست و به صورت معمول در کلونینگ DNA ، تشخیص بیماری ها و آنالیز DNA در پزشکی قانونی مورد استفاده است.
مواد مورد نیاز برای انجام واکنش PCR شامل آنزیم Taq پلیمراز، بافر مخصوص آنزیم ، MgCl2، پرایمر های اختصاصی طراحی شده از قطعه مورد نظر، DNA الگو و نوکلئوتید ها (dNTPs) هستند. تمامی موارد فوق به غیر از الگو و پرایمر ها در یک مستر میکس PCR با غلظت و شرایط بهینه فراهم می شوند.
چرخه PCR شامل ۳ مرحله اصلی است:
۱) دناتوره شدن (DNA (Denaturation:
طی این مرحله در دمای ۹۶ درجه سانتی گراد دو رشته DNA از یکدیگر جدا شده و الگوی تک رشته برای مرحله بعدی فراهم می آید.
۲) اتصال (Annealing):
این مرحله با کاهش دما به ۵۵ تا ۶۵ درجه سانتیگراد امکان اتصال پرایمر ها به توالی مکمل شان روی تک رشته DNA الگو فراهم می شود.
۳) تطویل (Extension):
با افزایش دما تا ۷۲ درجه سانتیگراد آنزیم Taq پلیمراز فعال و ساخت رشته جدید DNA از رشته الگوو در ادامه پرایمر صورت می گیرد، این چرخه بین ۲۵ تا ۳۵ بار درون دستگاه ترموسایکلر تکرار شده و در هر چرخه تعداد کپی های ساخته شده نسبت به مرحله قبل دو برابر می شود.
ویژگی های کیت های کیت مستر میکس PCR شرکت (Applied Biosystems (ABI
- قابلیت تکثیر قطعه ژن با طول ۶۰۰bp در ۴۵ دقیقه.
- تکثیر قطعات با کیفیت و اختصاصی مناسب برای توالی یابی.
- کاربری سریع و آسان.
- عدم محدودیت در اتصال پرایمر ها.
هنوز بررسیای ثبت نشده است.