نقد و بررسی کیت استخراج RNA-شرکت اینویتروژن
کیت استخراج (RNA (Real-time PCR
کیت استخراج RNA بر اساس اینکه از چه نمونه ای می توان استخراج را انجام داد مثل سلول،افت،مخمر، گیاهان و… و همچنین روش های استخراج و تعداد استخراج دارای کد های مختلف در برند های مختلف هستند.
کیت استخراج RNA
در روش های آنالیز بیان ژن ازجمله Real-time PCR، دقت در ارزیابی بیان ژن متاثر از غلظت و کیفیت RNA استخراجی است و خلوص و یکپارچگی RNA از ملاک های ضروری برای موفقیت می باشد.
برای استخراج RNA می توان از دو روش اصلی نام برد:
۱) روش دستی:
استفاده از محلولهای آلی برپایه Phenol-Guanidine Isothiocyanate که از شناخته شده ترین محصولات موجود در بازار میتوان به محلول با نام تجاری TRIzol اشاره کرد. برخلاف حفظ یکپارچگی RNA و راندمان بالای استخراج، از جمله معایب استخراج با این روش وجود آلودگی با پروتئین و سایر مواد سلولی، محلول های آلی، کلروفرم، نمک ها و اتانول و همچنین سمیت این محلول است که منجر به لزوم رعایت احتیاط های ایمنی مانند استفاده از هود شیمیایی میگردد.
۲) روش ستونی:
استخراجRNA به روش ستونی با استفاده از غشاهای سیلیکونی (silica-membrane based spin culumn) صورت می گیرد که تحت عنوان کیت های ستونی استخراج RNA به بازار عرضه می شوند. استفاده از کیت های ستونی استخراج RNA علاوه بر عدم استفاده از محلول های آلی سمی، روشی ساده, کارآمد و به صرفه هستند. راندمان بالا برای استخراج کامل و بینقص RNA با کمترین میزان آلودگی با پروتئین و سایر مواد سلولی از دیگر مزایای استفاده از کیت های ستونی استخراج RNA است. با این وجود به دلیل حضور الودگی DNA ژنومی، استفاده از انزیم DNase پس از استخراج ضروری خواهد بود.
ویژگی های کیت RNA شرکت اینویتروژن
- استخراج همزمان DNA ، RNA و پروتئین از یک نمونه.
- قابلیت لایز بالا برای هر نوع نمونه.
- دارای پروتوکل بهینه برای استخراج بافت، سلول، سرم، ویروس و باکتری.
هنوز بررسیای ثبت نشده است.