نقد و بررسی کیت استخراج DNA-شرکت نورژن
کیت استخراج DNA
DNA ماده وراثتی موجود در هسته سلول و دو رشته ای می باشد که از اتصال میلیون ها جفت نوکلوتید به همدیگر ساخته شده اند ،همه سلول های هسته دار DNA دارند، در بافت هایی مثل خون فقط گلبول های سفید دارند گلبول های قرمز و پلاکت ها که فاقد هسته هستند DNA ندارند، پایه تمام تحقیقات بیو تکنولوژی دستکاری DNA و آنالیز ان است ، کیت های استخراج DNA با توجه به نمونه ای که از آن می شود استخراج را انجام داد مثل باکتری ،بافت ،خون ، سرم، پلاسما و… همچنین روش استخراج و تعداد استخراج دارای کدهای مختلف در برندهای مختلف هستند،برای استفاده از کیت خریداری شده باید مراحل اصلی پروتکل کیت مربوطه مطالعه شود.
کیت استخراج DNA
استخراج DNA با خلوص و غلظت مناسب از جمله ضروریات در مطالعات مولکولی شامل PCR و qPCR ست. نخستین استخراج DNA در سال ۱۸۶۹ توسط فردریک میشر (Friedrich Miescher) بیولوژیست سوئیسی انجام شد و طی این سال ها با تلاش محققان بهبود یافته است.
استخراج DNA شامل ۳ مرحله اساسی است:
۱) لایز سلولی (lysis):
در این مرحله سلول و هسته آن به منظور خروج DNA شکسته می شوند. این فرایند با استفاده از روش های فیزیکی و استفاده از دترجنت ها و آنزیم هایی همچون پروتئیناز K (Proteinase K) که پروتئین های سلولی را هضم می کند صورت می گیرد.
۲) رسوب (precipitation) :
طی این مرحله DNA آزاد شده، از سایر مواد سلولی جدا می گردد. این کار با استفاده از یون های سدیم که خنثی کننده بار منفی DNA است صورت گرفته و در نتیجه DNA پایدار تر و نامحلول در آب می گردد. سپس با افزودن الکل، DNA ته نشین می شود.
۳) شست شو (Washing):
دراین مرحله که به خاص سازی هم (Purification) شناخته می شود، رسوب حاصل به وسیله الکل شسته شده و سایر بقایای سلولی حذف می گردد.
این مراحل می توانند به صورت سنتی و یا با استفاده از کیت استخراج DNA انجام شوند. یک کیت استخراج DNA روشی سریع آسان، غیر سمی و کارمد نسبت به روش سنتی ست که با در اختیار قرار دادن پروتکل بهینه برای استخراج از انواع بافت های مختلف مانع از خطا و اتلاف وقت محققان این حوزه می گردد.
ویژگی های کیت DNA شرکت Norgen (نورژن)
• استخراج به روش Rapid spin column
• راندمان بالای استخراج
• کیفیت بالای استخراج
هنوز بررسیای ثبت نشده است.